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近些年冬天冷夏天熱,,空調(diào)的使用率大大增加,,但要當心空調(diào)冷卻水中的隱形殺手----軍團菌。由軍團菌引起的軍團菌病是非典型肺炎的重要組成部分,,是一種暴發(fā)流行或散發(fā)流行的嚴重呼吸道傳染病,,世人第一次認識軍團病是在1976年7月,那時美國費城召開了第56屆美國退伍軍人年會,,與會者中有182人發(fā)生肺炎,,事后在病人肺組織中接種分離出一種致病菌,這種病菌來自旅館的空調(diào)系統(tǒng),,以后醫(yī)學界將這種病菌命名為嗜肺軍團菌,,把因這種病菌引起的疾病稱為軍團病。軍團菌是一種水中的細菌,,不僅存在于自然界水中,也存在于污染的水塔水,、熱水,、礦泉水中。隨著我國人民生活水平的提高,,尤其是大型建筑物,,如賓館、醫(yī)院公共設施等中央空調(diào)系統(tǒng)的使用日益普遍,,軍團病爆發(fā)流行的危險性也日益增加,,因此了解和掌握空調(diào)冷卻水中軍團菌的檢測方法,在預防和控制軍團病的發(fā)生與流行中有十分重要的作用?,F(xiàn)將其實驗室檢測方法作簡單介紹,。本文由永安昌盛中央空調(diào)維修網(wǎng)的小編轉載于互聯(lián)網(wǎng)。
一、 細菌培養(yǎng)和鑒定
1.樣品處理:水樣中的菌經(jīng)過濾膜或離心濃縮,,為減少雜菌生長,,濃縮樣品的一部分經(jīng)酸處理與熱處理,一部分不做處理,,將上述處理與未處理樣品分別接種GVPC瓊脂平板,,在5% CO2,35~36℃環(huán)境下培養(yǎng)7一lOd,。
2.初步鑒定:軍團菌的菌落顏色多樣,,通常呈白色、灰色,、藍色或紫色,,也能顯深褐 色、灰綠色,、深紅色,。軍團菌在GVPC選擇性平板上可形成直徑1~2 mm、灰白色,、圓形,、表面光滑、邊緣清楚整齊的菌落,,在紫外燈下,,有熒光,為革蘭氏陰性桿菌,。在選擇性平板上挑選可疑菌落,,接種于BCYE瓊脂平板和 BCYE-Cys平板進行傳代培養(yǎng),36±1℃培養(yǎng)至少 2d,,凡在前者上生長而在后者上不生長的即為軍團菌,。
3.生化鑒定:常用的生化實驗有糖發(fā)酵試驗、淀粉水解試驗,、觸酶試驗,、明膠液化試驗、內(nèi)酰胺酶試驗,、硝酸鹽還原試驗,、尿素酶試驗、馬尿酸鹽水解試驗等,。
二,、分型鑒定:采用軍團菌乳膠凝集試劑盒進行分型診斷,我國常見的型別有Lp1,、Lp3,、Lp5,、Lp6、Lp9等,。
三,、PCR 法檢測菌株特異系性基因:主要檢測基因種類為軍團菌屬特異基因5sRNA、16sRNA和嗜肺軍團菌種特異基因Mip基因,。
四,、其他檢測方法:常用的方法有放射免疫法(R1A)、酶免疫法(EIA),、直接熒光抗體法(DFA),、免疫層析法(ICA)等多種方法;此外,核酸探針技術是近幾年發(fā)展起來的一種快速診斷軍團菌病原體的方法,,根據(jù)軍團菌的核酸序列合成一段寡核苷酸,,用同位素標記,并與被檢測核酸分子雜交,,通過檢測放射性信號,,確定軍團菌感染。這種方法具有特異性高,,快速等優(yōu)點,。
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